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產品規格：20 μL×20T, 20 μL×100T

產品內容

* MasterMix 包含以下組分：逆轉錄酶，RNA 酶抑制劑，dNTPs, buffer, Oligo(dT)20和隨機引物。
儲存條件：儲存于-20℃，有效期見外包裝。

產品介紹 

     UEIris II RT-PCR System for First-Strand cDNA Synthesis 是將RNA合成cDNA的一個操作更為簡便的系統， 含有第一鏈 cDNA 合成所需的全部試劑，僅需加入 RNA 模板，dsDNase 和水即可進行逆轉錄反應。合成的第一鏈 cDNA 可廣泛應用于第二鏈合成、雜交、PCR 擴增、 Real Time PCR 反應等。

UEIris II 預混液中的逆轉錄酶是全新開發的新一代逆轉錄酶。該酶具有更快的反應速度，只需 10 min 即可完成逆轉錄反應。該逆轉錄酶還具有產物得率更高、獲得的 cDNA 片段更長、模板使用范圍更廣等特點。

    試劑盒中的 dsDNase 特異性消化雙鏈 DNA，而不消化單鏈 DNA 和 RNA，并且具有熱敏感性，可在 55℃快速地不可逆失活，實現去除基因組污染與逆轉錄反應同步完成。

使用方法

1. 在冰浴的無核酸酶的離心管中配制下列逆轉錄體系：

2. 輕輕混勻，瞬時離心（使液體沉于底部）； 

3. 在 PCR 儀上進行下列條件的反應： 37℃溫育 2 分鐘，去除基因組污染 55℃，孵育 10 min（若目標 RNA 小于 3 kb，可適當縮短反應時間至 5 min） 85℃，10 sec 

4. 將獲得的產物迅速置于冰上或立即保存于-20℃，用于后續實驗。

注意事項 

    1. RNA 模板的純度和完整性是影響逆轉錄效果的重要因素， 如模板中含有蛋白、EDTA、酚等雜質或 RNA 降解。 

    2. 若后續實驗為 qPCR，逆轉錄產物的加量應不超過PCR 體系終體積的 1/10，如 20 μL 的 PCR 反應體系，逆轉錄產物的加量應不超過 2 μL。 

    3. 預混液中已經包含 Oligo(dT)20VN 和隨機引物，不僅適用于包 Poly(A) 結構的真核生物 mRNA，也適用于不含 Poly(A)結構的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 等 模板，但不適用于 miRNA 等小 RNA 模板。